danДоклады Национальной академии наук БеларусиDoklady of the National Academy of Sciences of Belarus1561-83232524-2431The Republican Unitary Enterprise Publishing House "Belaruskaya Navuka"dan-58Research ArticleХИМИЯCHEMISTRYНОВЫЙ ПОДХОД К ИММУНОХИМИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ БРАССИНОСТЕРОИДОВA NEW APPROACH TO IMMUNOCHEMICAL DETERMINATION OF BRASSINOSTEROIDSСАВЧУКА. Л.SAUCHUKA. L.alina_kyrtikova@mail.ruКУПРИЕНКОО. С.KUPRIENKOO. S.olga_garbuz@iboch.bas-net.byЛИТВИНОВСКАЯР. П.LITVINOVSKAYAR. P.litvin@iboch.bas-net.byСВИРИДОВО. В.SVIRIDOVO. V.sviridov@iboch.bas-net.byХРИПАЧВ. А.KHRIPACHV. A.

академик

khripach@iboch.bas-net.byИнститут биоорганической химии НАН Беларуси, МинскBelarus2015250520165916367Copyright © САВЧУК А.Л., КУПРИЕНКО О.С., ЛИТВИНОВСКАЯ Р.П., СВИРИДОВ О.В., ХРИПАЧ В.А., 20162016САВЧУК А.Л., КУПРИЕНКО О.С., ЛИТВИНОВСКАЯ Р.П., СВИРИДОВ О.В., ХРИПАЧ В.А.SAUCHUK A.L., KUPRIENKO O.S., LITVINOVSKAYA R.P., SVIRIDOV O.V., KHRIPACH V.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://doklady.belnauka.by/jour/article/view/58

Впервые получены реагенты и разработана методика лантанидного иммунофлуориметрического анализа фитогормональных стероидов 24-эпикастастерона и 24-эпибрассинолида. В реакции N-сукцинимидного эфира 6-(О-карбоксиметил)оксима 24-эпикастастерона с европиевой солью N1-(аминоэтил)амида диэтилентриаминпентауксусной кислоты синтезирован низкомолекулярный конъюгат брассиностероид-комплексонат Eu3+. Продуктом одновременного ацилирования первичных аминогрупп полипептидной цепи альбумина активированными эфирами карбоксипроизводных 24-эпикастастерона и комплексоната Eu3+ является белковый конъюгат, обладающий высокой удельной флуоресцентной активностью. При использовании высокомолекулярного конъюгата в иммунохимической системе получена линейная зависимость флуоресцентного сигнала меченого 24-эпикастастерона, связанного с иммобилизованными антителами, от концентрации 24-эпибрассинолида (1–300 нМ) в растворе.

For the first time, reagents have been synthesized and a technique has been developed for a lanthanide immunofluorometric assay of phytohormonal steroids of 24-epicastasterone and 24-epibrassinolide. A low-molecular-weight conjugate of the brassinosteroid and an Eu3+ complexonate was synthesized by the reaction of 24-epicastasterone-6-(O-carboxymethyl) oxime N-succinimide ester with the europium salt of the diethylenetriaminepentaacetic acid N1-(aminoethyl)amide. A protein conjugate with a high specific fluorescent activity was the product of a simultaneous acylation of primary amino groups in albumin with activated esters of carboxyl derivatives of 24-epicastasterone and an Eu3+ complexonate. Using the high-molecular weight conjugate in an immunochemical system, a linear relationship was obtained between a fluorescent signal of labeled 24-epiсastasterone bound to immobilized antibodies and 24-epibrassinolide concentration in the range of 1 to 300 nM.

ReferencesKhripach V. A., Zhabinskii V. N., de Groot A. Brassinosteroids. A new class of plant hormones. San Diego: Acad. Press, 1999.Khripach V. A., Zhabinskii V. N., de Groot A. Brassinosteroids. A new class of plant hormones. San Diego: Acad. Press, 1999.Хрипач В. А., Свиридов О. В., Прядко А. Г. и др. // Биоорг. химия. 2007. Т. 33, № 3. С. 371–378 .Хрипач В. А., Свиридов О. В., Прядко А. Г. и др. // Биоорг. химия. 2007. Т. 33, № 3. С. 371–378 .Хрипач В. А., Литвиновская Р. П., Драч С. В. и др. // Докл. НАН Беларуси. 2009. Т. 53, № 6. С. 74–77.Хрипач В. А., Литвиновская Р. П., Драч С. В. и др. // Докл. НАН Беларуси. 2009. Т. 53, № 6. С. 74–77.Khripach V., Zhabinskii V., Antonchick A. et al. // Natural Product Commun. 2008. Vol. 3, N 5. Р. 735–748.Khripach V., Zhabinskii V., Antonchick A. et al. // Natural Product Commun. 2008. Vol. 3, N 5. Р. 735–748.Khripach V. A., Zhabinskii V. N., Litvinovskaya R. P. // Brassinosteroids: a Class of Plant Hormones / eds. S. Hayat and A. Ahmad. Dordrecht, 2011. P. 375–392.Khripach V. A., Zhabinskii V. N., Litvinovskaya R. P. // Brassinosteroids: a Class of Plant Hormones / eds. S. Hayat and A. Ahmad. Dordrecht, 2011. P. 375–392.Pradko A. G., Litvinovskaya R. P., Sauchuk A. L. et al. // Steroids. 2014. DOI: 10.1016/j.steroids.2014.08.022.Pradko A. G., Litvinovskaya R. P., Sauchuk A. L. et al. // Steroids. 2014. DOI: 10.1016/j.steroids.2014.08.022.Mikola H., Miettinen P. // Steroids. 1991. Vol. 56. P. 17–21.Mikola H., Miettinen P. // Steroids. 1991. Vol. 56. P. 17–21.Mikola H., Takalo H., Hemmilä I. // Bioconjugate Chem. 1995. Vol. 6, N 3. P. 235–241.Mikola H., Takalo H., Hemmilä I. // Bioconjugate Chem. 1995. Vol. 6, N 3. P. 235–241.Mikola H., Sundell A.-C., Hänninen E. // Steroids. 1993. Vol. 58. P. 330–334.Mikola H., Sundell A.-C., Hänninen E. // Steroids. 1993. Vol. 58. P. 330–334.Бекман Н. И., Ларичева С. Ю., Помелова В. Г., Осин Н. С. // Клиническая лабораторная диагностика. 2010. № 12. С. 33–35.Бекман Н. И., Ларичева С. Ю., Помелова В. Г., Осин Н. С. // Клиническая лабораторная диагностика. 2010. № 12. С. 33–35.Peuralahti J., Suonpää K., Blomberg K. et al. // Bioconjugate Chem. 2004. Vol. 15, N 4. P. 927–930.Peuralahti J., Suonpää K., Blomberg K. et al. // Bioconjugate Chem. 2004. Vol. 15, N 4. P. 927–930.Райченок Т. Ф., Литвиновская Р. П., Жабинский В. Н. и др. // Химия природных соединений. 2012. № 2. С. 1–4.Райченок Т. Ф., Литвиновская Р. П., Жабинский В. Н. и др. // Химия природных соединений. 2012. № 2. С. 1–4.Irani N. G., Rubbo S. D., Mylle E. et al. // Nature Chemical Biology. 2012. Vol. 8, N 6. P. 583–589.Irani N. G., Rubbo S. D., Mylle E. et al. // Nature Chemical Biology. 2012. Vol. 8, N 6. P. 583–589.Гарбуз О. С., Дубовская Л. В., Свиридов О. В. // Докл. НАН Беларуси. 2014. Т. 58, № 1. С. 68–74.Гарбуз О. С., Дубовская Л. В., Свиридов О. В. // Докл. НАН Беларуси. 2014. Т. 58, № 1. С. 68–74.Гарбуз О. С., Семенов Д. А. // Молодежь в науке–2013: прил. к журн. «Весцi НАН Беларусi»: в 5 ч. 2014. Ч. 1. С. 13–19.Гарбуз О. С., Семенов Д. А. // Молодежь в науке–2013: прил. к журн. «Весцi НАН Беларусi»: в 5 ч. 2014. Ч. 1. С. 13–19.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.