danДоклады Национальной академии наук БеларусиDoklady of the National Academy of Sciences of Belarus1561-83232524-2431The Republican Unitary Enterprise Publishing House "Belaruskaya Navuka"10.29235/1561-8323-2020-64-3-287-292dan-882Research ArticleХИМИЯCHEMISTRYФункционализованные дрожжевым лизатом микросферы из сшитого глутаральдегидом поливинилового спиртаmicrospheres made by crosslinking of polyvinyl alcohol with glutaraldehyde functionalized with yeast lysateЛазневК. В.LaznevK. V.

Лазнев Константин Владимирович – науч. сотрудник

ул. Ф. Скорины, 36, 220141, Минск

Laznev Konstantin V. – Researcher

36, F. Skоrina Str., 220141, Minsk

kvlaznev@mail.ruИгнатовичЖ. В.IgnatovichZh. V.

Игнатович Жанна Владимировна – канд. хим. наук, вед. науч. сотрудник

ул. Ф. Скорины, 36, 220141, Минск

Ignatovich Zhanna V. – Ph. D. (Chemistry), Leading researcher

36, F. Skorina Str., 220141, Minsk

ignatovichz@inbox.ruАгабековВ. Е.AgabekovV. E.

Агабеков Владимир Енокович – академик, д-р хим. наук, профессор, директор

ул. Ф. Скорины, 36, 220141, Минск

Agabekov Vladimir E. – Academician, D. Sc. (Chemistry), Professor, Director

36, F. Skorina Str., 220141, Minsk

ichnm@ichnm.basnet.byИнститут химии новых материалов Национальной академии наук БеларусиInstitute of Chemistry of New Materials of the National Academy of Sciences of Belarus202009072020643287292Copyright © Лазнев К.В., Игнатович Ж.В., Агабеков В.Е., 20202020Лазнев К.В., Игнатович Ж.В., Агабеков В.Е.Laznev K.V., Ignatovich Z.V., Agabekov V.E.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://doklady.belnauka.by/jour/article/view/882

Путем сшивки глутаральдегидом поливинилового спирта (ПВС), 25 г/л раствор которого, содержащий наночастицы магнетита, был диспергирован в изооктане с добавками ПАВ Span 85 и Tween 85, получены магнитные микросферы (ММС), сопоставимые по размеру с дрожжевыми клетками. Клеточные стенки дрожжей солюбилизированы путем частичного гидролиза в муравьиной кислоте при обработке ультразвуком и температуре ≈100 °С. Добавкой лизата клеточных стенок дрожжей в сшиваемый раствор ПВС и последующей обработкой разбавленным лизатом микросферы функционализованы как мишени для фагоцитоза. Получены флуоресцентные микросферы при использовании в качестве дисперсионной среды изооктана с добавками ПАВ Span 85 и Tween 85, насыщенного флуорохромами – производными 2-аминопиримидина. Разработана методика оценки фагоцитарной активности лейкоцитов с применением функционализованных таким образом ММС.

Microspheres comparable with yeast cells in size were obtained by the glutaraldehyde crosslinking of polyvinyl alcohol (PVA), whose 25 g/l water solution containing magnetite particles was dispersed in the isooctane/Span 85/Tween 85 medium. yeast cell walls were partially hydrolysed by sonication in formic acid near the boiling point. The microspheres were made targets for phagocytosis by the addition of yeast lysate to the crosslinkable PVA solution and a subsequent treatment of the freshly crosslinked microspheres with diluted yeast lysate. The microspheres were also made fluorescent when the emulsification medium saturated with fluorescent 2-aminopyrimidine derivatives was used. A protocol for phagocytosis assay using the thus modified microspheres was developed.

микросферыдрожжифагоцитозполивиниловый спиртmicrospheresyeastsphagocytosispolyvinyl alcoholReferencesКолісник, Н. В. Біологія нейтрофілів, сучасний погляд. Огляд / Н. В. Колісник, Ж. С. Качанова // Вісн. Запоріз. нац. ун-ту. – 2009. – № 1. – С. 80–91.kolisnik N. V., kachanova Zh. S. Biology of neutrophils, modern look. A review. Visnik Zaporizkoho nacional’noho universitetu [Bulletin of Zaporizhzhіa National University], 2009, no. 1, pp. 80–91 (in Ukrainian).Метод комплексной оценки фагоцитарной активности нейтрофилов крови. Инструкция по применению / А. М. Горчаков [и др.]. – Минск, 2003. – 15 с.Gorchakov A. M., kruchinski N. G., Gorchakova F. T., korosteliova I. N. Method for complex assay of phagocytic activity of neutrophils. Manual. Minsk, 2003. 15 p. (in Russian).pHrodoTm BioParticles® phagocytosis kits for flow cytometry [Electronic resource]. – Mode of access: https://tools.lifetechnologies.com/content/sfs/manuals/mp10025.pdf. – Date of access: 21.10.2019.pHrodoTM BioParticles® phagocytosis kits for flow cytometry. Available at: https://tools.lifetechnologies.com/content/sfs/manuals/mp10025.pdf (accessed 21 October 2019).Cayman ChemicalTm phagocytosis assay kit (IgG FITC) [Electronic resource]. – Mode of access: https://www.caymanchem.com/pdfs/500290.pdf .– Date of access: 21.10.2019.Cayman ChemicalTM phagocytosis assay kit (IgG FITC). Available at: https://www.caymanchem.com/pdfs/500290.pdf (accessed 21 October 2019).kuwana, E. Fluorescence lifetime spectroscopy of a pH-sensitive dye encapsulated in hydrogel beads / E. kuwana, F. Liang, E. M. Sevick-Muraca // Biotechnol Prog. – 2004. – Vol. 20, N 5. – P. 1561–1566. https://doi.org/10.1021/bp034328ikuwana E., Liang F., Sevick-Muraca E. M. Fluorescence lifetime spectroscopy of a pH-sensitive dye encapsulated in hydrogel beads. Biotechnology Progress, 2004, vol. 20, no. 5, pp. 1561–1566. https://doi.org/10.1021/bp034328iПоливинилспиртовые магнитные микросферы, содержащие 2-аминопиримидин-бис-этенбис-диалкилфениламины в качестве флуоресцентных индикаторов рН / К. В. Лазнев [и др.] // Докл. Нац. акад. наук Беларуси. – 2018. – Т. 62, № 5. – С. 563–568. https://doi.org/10.29235/1561-8323-2018-62-5-563-568Laznev k. V., Ignatovich Zh. V., kukhta I. N., Agabekov V. E. Polyvinyl alcohol magnetic microspheres containing 2-aminopyrimidin-bis(ethene)-bis(dialkylphenylamine) compounds as fluorescent pH indicators. Doklady Natsional’noi akademii nauk Belarusi = Doklady of the National Academy of Sciences of Belarus, 2018, vol. 62, no. 5, pp. 563–568 (in Russian). https://doi.org/10.29235/1561-8323-2018-62-5-563-568ImageJ: Image processing and analysis in Java [Electronic resource]. – Mode of access: https://imagej.nih.gov/ij/. – Date of access: 25.02.2020.ImageJ: Image processing and analysis in Java. Available at: https://imagej.nih.gov/ij/ (accessed 25 February 2020).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.