A NEW APPROACH TO IMMUNOCHEMICAL DETERMINATION OF BRASSINOSTEROIDS
Abstract
For the first time, reagents have been synthesized and a technique has been developed for a lanthanide immunofluorometric assay of phytohormonal steroids of 24-epicastasterone and 24-epibrassinolide. A low-molecular-weight conjugate of the brassinosteroid and an Eu3+ complexonate was synthesized by the reaction of 24-epicastasterone-6-(O-carboxymethyl) oxime N-succinimide ester with the europium salt of the diethylenetriaminepentaacetic acid N1-(aminoethyl)amide. A protein conjugate with a high specific fluorescent activity was the product of a simultaneous acylation of primary amino groups in albumin with activated esters of carboxyl derivatives of 24-epicastasterone and an Eu3+ complexonate. Using the high-molecular weight conjugate in an immunochemical system, a linear relationship was obtained between a fluorescent signal of labeled 24-epiсastasterone bound to immobilized antibodies and 24-epibrassinolide concentration in the range of 1 to 300 nM.
About the Authors
A. L. SAUCHUK
Институт биоорганической химии НАН Беларуси, Минск
Belarus
Belarus
O. S. KUPRIENKO
Институт биоорганической химии НАН Беларуси, Минск
Belarus
Belarus
R. P. LITVINOVSKAYA
Институт биоорганической химии НАН Беларуси, Минск
Belarus
Belarus
O. V. SVIRIDOV
Институт биоорганической химии НАН Беларуси, Минск
Belarus
Belarus
V. A. KHRIPACH
Институт биоорганической химии НАН Беларуси, Минск
Belarus
Belarus
References
1. Khripach V. A., Zhabinskii V. N., de Groot A. Brassinosteroids. A new class of plant hormones. San Diego: Acad. Press, 1999.
2. Хрипач В. А., Свиридов О. В., Прядко А. Г. и др. // Биоорг. химия. 2007. Т. 33, № 3. С. 371–378 .
3. Хрипач В. А., Литвиновская Р. П., Драч С. В. и др. // Докл. НАН Беларуси. 2009. Т. 53, № 6. С. 74–77.
4. Khripach V., Zhabinskii V., Antonchick A. et al. // Natural Product Commun. 2008. Vol. 3, N 5. Р. 735–748.
5. Khripach V. A., Zhabinskii V. N., Litvinovskaya R. P. // Brassinosteroids: a Class of Plant Hormones / eds. S. Hayat and A. Ahmad. Dordrecht, 2011. P. 375–392.
6. Pradko A. G., Litvinovskaya R. P., Sauchuk A. L. et al. // Steroids. 2014. DOI: 10.1016/j.steroids.2014.08.022.
7. Mikola H., Miettinen P. // Steroids. 1991. Vol. 56. P. 17–21.
8. Mikola H., Takalo H., Hemmilä I. // Bioconjugate Chem. 1995. Vol. 6, N 3. P. 235–241.
9. Mikola H., Sundell A.-C., Hänninen E. // Steroids. 1993. Vol. 58. P. 330–334.
10. Бекман Н. И., Ларичева С. Ю., Помелова В. Г., Осин Н. С. // Клиническая лабораторная диагностика. 2010. № 12. С. 33–35.
11. Peuralahti J., Suonpää K., Blomberg K. et al. // Bioconjugate Chem. 2004. Vol. 15, N 4. P. 927–930.
12. Райченок Т. Ф., Литвиновская Р. П., Жабинский В. Н. и др. // Химия природных соединений. 2012. № 2. С. 1–4.
13. Irani N. G., Rubbo S. D., Mylle E. et al. // Nature Chemical Biology. 2012. Vol. 8, N 6. P. 583–589.
14. Гарбуз О. С., Дубовская Л. В., Свиридов О. В. // Докл. НАН Беларуси. 2014. Т. 58, № 1. С. 68–74.
15. Гарбуз О. С., Семенов Д. А. // Молодежь в науке–2013: прил. к журн. «Весцi НАН Беларусi»: в 5 ч. 2014. Ч. 1. С. 13–19.
Review
Views: 824
Email this article 